Антитіла

Глобуліни сироватки крові людини і тварин, що утворюються у відповідь на потрапляння в організм різних антигенів (що належать бактеріям, вірусам, білковим токсинам). Антитіла вступають в реакції специфічної взаємодії з даними антигенами, в результаті чого відбувається дезактивація відповідних бактерій, вірусів і токсинів.

Антитіла є важливим елементом імунної системи і беруть участь у багатьох процесах, що відповідають за захист організму. Людина щодня стикається з величезною кількістю чужорідних агентів, з багатьма з яких вона зустрічається вперше, що створює потребу в постійній адаптації захисних систем організму, представлених клітинним імунітетом, виконання завдань якого покладено на спеціалізовані клітини, і гуморальним, представленим специфічними (антитіла) і неспецифічними структурами . Величезний прогрес в дослідженні механізмів функціонування і регуляції імунітету був досягнутий в кінці XIX століття роботою двох великих вчених – Іллі Мечникова, основоположника клітинної теорії, і Пауля Ерліха, основоположника гуморальної теорії.

Антитіла

Антитіла представлені білковими молекулами Y-подібної форми, що складаються з чотирьох поліпептидних ланцюгів (двох ідентичних легких і важких). Кожен легкий ланцюг з’єднаний тільки з одним важливим ланцюгом, в той час як важкі ланцюги з’єднані між собою. Антитіла мають три кінця, два з яких називаються Fab-фрагментами (fragment antigen binding, тобто фрагментами, що відповідають за зв’язування антигенів) і один – Fc-фрагмент (назва обумовлена ​​його тенденцією до кристалізації в розчинах). Fc фрагмент відповідає за виконання біологічних функцій антитіл, зв’язуючись з рецепторами на лімфоцитах і макрофагах або викликаючи активацію комплементу.

Деякі антитіла об’єднані в мультимери, що складаються з двох і більше молекул, з’єднаних між собою.

Завдяки широкій варіабельності Fab-фрагментів, антитіла здатні зв’язувати величезну кількість антигенів, що включають як макромолекули, так і маленькі хімічні сполуки. Ділянки антигенів, що містять унікальну послідовність хімічних сполук, впізнавану антитілами, називають епітопами. Сила, з якою Fab-фрагмент взаємодіє з епітопом, називається афінитетом.

Антитіла можуть як вільно циркулювати, так і бути пов’язаними з мембраною, будучи рецепторами В – лімфоцитів. У Т-лімфоцитів ж рецепторами можуть бути тільки ТCR (T cell receptor complex). Секретуються антитіла в нормі представлені в крові і на слизових, виконуючи функції нейтралізації і видалення мікробів і токсинів. Антитіла також називають імуноглобулінами, коли вони потрапляють в кровотік, на слизову або стають рецепторами В-лімфоцитів.

Після взаємодії Fc фрагмента з антитілом, пов’язаним з антигенною детермінантою, сигнал через спеціальний комплекс передається всередину клітини, приводячи до її активації.

Важливо зрозуміти, що впізнавання чужорідних агентів відбувається у випадковому порядку, і збіг між індивідуальними ділянками антигенів і Fab-фрагментами антитіл обумовлено величезною кількістю і варіабельністю клонів лімфоцитів.

Антитіла у дітей

Імунітет у новонароджених не здатний повноцінно протистояти всім загрозам зовнішнього середовища, що обумовлено низьким ступенем його розвитку. Поступове вдосконалення імунної відповіді відбувається паралельно з розвитком інших органів і систем, однак протягом цього процесу можна спостерігати «критичні періоди», супроводжувані недостатністю імунного захисту.

Критичні періоди:

Перший критичний період триває перші 29 днів життя і обумовлений тим, що імунний захист дитини представлений ​​переважно антитілами матері, що потрапили в організм дитини через плаценту або грудне молоко. В цьому періоді підвищено ризик бактеріальних і вірусних інфекцій. Особливу увагу слід приділити недоношеним.

Другий критичний період спостерігається на 4-6 місяці життя і обумовлений виснаженням пулу антитіл, які потрапили в організм дитини від матері через плаценту і низькою спроможністю до синтезу своїх антитіл. Крім того, класом антитіл, виробленим в цьому періоді, є антитіла класу М. Майже повна відсутність імуноглобулінів G, що є головними захисниками, і інших класів антитіл, призводить до низької стійкості дитини в цьому віці до інфекцій, що передаються повітряно-крапельним і кишковим шляхами.

Третій критичний період можна спостерігати на 2-му році життя, що пов’язано з активною пізнавальною діяльністю дитини і неповноцінним імунним захистом. У зв’язку з недостатньою секрецією Ig А, що відповідає за місцевий імунітет, зберігається висока сприйнятливість до інфекцій, що передаються повітряно-крапельним і кишковим шляхами.

Четвертий критичний період спостерігається на 6-7 роках життя, що пов’язано з фізіологічним зменшенням кількості лімфоцитів, однак низький рівень Ig A призводить до того, що слизові оболонки не здатні повноцінно протистояти інфекціям, що передаються повітряно-крапельним і кишковим шляхами. Крім того, високий рівень IgE, обумовлений значною частотою глистових інвазій, підвищує ймовірність розвитку алергічних реакцій в цій віковій групі.

П’ятий критичний період спостерігається в підлітковому віці і обумовлений відносною невідповідністю обсягу органів імунної системи фактичним розміром організму. Також підвищення секреції статевих гормонів призводить до пригнічення клітинного компонента імунної системи. Як правило, спостерігається висока сприйнятливість до захворювань вірусної природи.

У дітей також можуть зустрічатися спадкові захворювання, при яких спостерігається дефект гуморальної ланки імунітету.

До дисгамаглобулінемії відносять:

• Недолік антитіл A класу;
• Недолік антитіл G класу;
• Недолік транскобаламіну II;
• Гіпер-IgM- синдром;
• Гіпер-IgE синдром;
• Гіпер-IgD синдром.

Антитіла у дорослих

У зрілому віці у людей імунна система, як правило, повністю сформована і наділена великими компенсаторними можливостями, що дозволяють адаптуватися до умов, що змінюються або важких умов навколишнього середовища. Однак шкідливий вплив несприятливих факторів зовнішнього середовища може призводити до значного зниження рівня імунного захисту. Усунення шкідливих факторів, як правило, відновлює її первісний рівень.

Антитіла при вагітності, що впливають на її перебіг

Вагітність є складним фізіологічним процесом, що протікає протягом тривалого, близько 40 тижнів в нормі, терміну. У цей період харчування і дихання плода, що знаходиться всередині материнського організму, здійснюється через гемоплацентарний бар’єр. Разом з газами, розчиненими в крові, і поживними речовинами, через плаценту можуть проходити імуноглобуліни. Однак, в нормі не всі антитіла при вагітності можуть потрапляти в кров плода. Цією здатністю володіють тільки Ig G. Їх основною метою в цьому періоді є запобігання розвитку внутрішньоутробних інфекцій або септичних станів.

На жаль, не завжди антитіла при вагітності відіграють позитивну роль. Так, розвиток імунних реакцій, спрямованих проти свого плоду, не є рідкісним явищем і може призводити до переривання вагітності на ранніх термінах.

Так, можливе формування антитіл при вагітності до білкових структур на поверхні плода, що відповідає за резус-фактор або групу крові.

Резус-фактор присутній у 85% населення і, при його наявності на поверхні еритроцитів, він вважається позитивним. При наявності позитивного резус-фактора у плода, в той час як у матері він негативний, висока ймовірність розвитку антитіл до еритроцитів і їх подальшого гемолізу. Гемоглобін, що виділяється при цьому перетворюється в білірубін, в високих концентраціях володіє токсичним впливом на нервову тканину. За умови, що мати не стикалася раніше з резус-позитивною кров’ю і у неї відсутні антитіла до резус-фактору, перша вагітність може протікати без ускладнень. Під час пологів проводиться ін’єкція анти-Д-імуноглобуліну, що в ряді випадків дозволяє полегшити перебіг другої вагітності і знизити ризик резус-конфлікту при повторній вагітності до 10-15%. Однак, аналіз на антитіла може бути позитивним і якщо не було першої вагітності і становить 3% після викидня, після медичного аборту в 5%, а при позаматковій вагітності-в 1% випадків.

Антитіла при вагітності до еритроцитів плода також можуть вироблятися у матері з I групою крові при народженні дитини з II або III групами, що також може призводити до гемолізу еритроцитів, приводячи до смерті плоду.

Роль антитіл в материнському молоці

У зв’язку з незрілістю імунного захисту новонароджених, вироблення власних антитіл у них практично відсутній, що значно підвищує ризик розвитку інфекційних процесів. Відразу після пологів в грудному молоці міститься величезна кількість Ig A, що відповідають за захист слизових оболонок і значно знижують ризик захворювань інфекційної природи. Крім того, в організмі дитини циркулюють антитіла, що потрапили в кров дитини через плаценту ще до пологів.

Таким чином, використання замінників грудного молока значно погіршує прогноз щодо імунного захисту і не повинно відбуватися без серйозних показань.

Антитіла у літніх

Так як антитіла є невід’ємною частиною імунітету, не можна оцінювати їх стан окремо від загального стану імунної системи.

У людей з віком в нормі відбуваються зміни, що зачіпають імунні процеси:

• інволюція тимуса;
• дегенеративні зміни кісткового мозку;
• дегенеративні зміни органів лімфоїдної системи.

Інволютивні зміни в тимусі починаються під час статевого дозрівання і позначаються на ефективності клітинного компонента імунітету, що підвищує ризик інфекційних і онкологічних хвороб.

На відміну від клітинного, гуморальний імунітет менше схильний до впливу віку, хоч і може спостерігатися незначне зниження рівня природних імуноглобулінів.

Однак, через зниження ефективності клітинного і гуморального компонентів імунітету, підвищується ймовірність утворення аутоантитіл, що підвищує ризик розвитку ревматоїдного артриту, тиреоїдиту та інших аутоімунних захворювань. Однією з причин утворення антитіл до власних тканин є зниження контролю за клітинами, які зазнали мутацій і не були знищені клітинним імунітетом.

Слід зазначити, що відзначається зниження атопій при збільшенні інфекційної і хімічної форм алергії з підвищенням ризику розвитку анафілактичного шоку.

Класи антитіл

Ланцюги, які беруть участь в утворенні молекули антитіла, мають варіабельні ділянки (формуються в результаті складного процесу відбору окремих ділянок ДНК В-лімфоцитів і беруть участь у формуванні Fab-фрагментів) і константні ділянки (беруть участь у формуванні Fc-фрагментів і визначають біологічні функції молекули). Залежно від того, які константні ділянки були синтезовані, виділяють 2 види легких ланцюгів і 5 видів важких ланцюгів, проте визначальне значення відіграють важкі ланцюги, в залежності від яких виділяють п’ять ізотипів, або класів:

• Ig M;
• Ig D;
• Ig G;
• Ig E;
• Ig A.

Кожен ізотип має певні функції і біологічні властивості.

Антигенними рецепторами неактивованих В-лімфоцитів є пов’язані з мембраною Ig M або Ig D антитіла. Після одночасної стимуляції антигеном і Т-хелперів, В-лімфоцит, який відповідає конкретному антигену, активно ділиться і диференціюється на різні клони, які синтезують певні класи антитіл.

Антитіла класу М

Тривалість життя складає 5 днів.

Існують в формі пентамер (складаються з п’яти молекул антитіл форми Y, з’єднаних в області Fc-фрагмента).

Функції антитіл класу М:

• Активація комплементу;
• Рецептор В-лімфоцитів.

Антитіла G класу

Тривалість життя складає 23 дня. Існують антитіла G класу в якості мономера, вільно циркулюючи в кровотоці.

Функції Ig G:

• Опсонізація;
• Активація комплементу;
• Антитіло-опосередкована цитотоксичність;
• Забезпечують неонатальний імунітет;
• Є основними антитілами, що синтезуються у відповідь на повторну активацію клітин пам’яті ідентичним антигеном;
• Пригнічення активності В-лімфоцитів за способом зворотного зв’язку.

Антитіла класу А

Тривалість життя складає 6 днів. Існують в формі мономерів, димарів і тримерів.

Функція антитіл класу Ig A полягає в захисті слизових від чужорідних агентів шляхом їх зв’язування до потрапляння в тканини.

Антитіла класу Е

Тривалість життя складає 2 дні.

Антитіла класу Е мають дві основні функції:

• Є рецепторами базофілів; (норма базофілів)
• Відповідають на паразитарну інвазію.

Антитіла класу D

Антитіла класу D є рецепторами лімфоцитів, в зв’язку з чим тривалість їх існування визначається тривалістю життя імунної клітини. У вільній, циркулюючій формі не існують.

Як аналіз на антитіла допомагає визначити причину хвороби

Аналіз на антитіла грає величезне, а в деяких випадках навіть вирішальне значення в постановці діагнозу захворювання, так як він відображає процеси, що протікають в гуморальній ланці імунітету.

Визначення кількості і підкласу антитіл дозволяє судити про тривалість і природу захворювання, а в деяких випадках можливе визначення конкретного збудника, що викликав хворобу, тому широко застосовується в спеціалізованих установах при постановці таких діагнозів, як вірусний гепатит, ВІЛ та інших.

Норма антитіл

У нормі антитіла можна виявити в кровотоці, на слизових і, особливо, в лімфоїдних органах, де в основному і відбувається активація імунної відповіді. Це обумовлено постійним контактом організму із зовнішнім середовищем, що складається з чужорідних агентів.

Для визначення антитіл проводиться ряд тестів, які оцінюють кількісні та якісні характеристики гуморального компонента імунної системи. Також рекомендується оцінювати зміни їх рівня в динаміці.

Норма антитіл в сироватці крові становить:

• У чоловіків: IgM (0,55-1,41 г / л); IgG (6,64-14,0 г / л); IgA (1,03-4,04 г / л);
• У жінок: IgM (0,37-1,95 г / л); IgG (5,87-16,3 г / л); IgA (0,54-3,43 г / л).

Підвищені антитіла одного або декількох підкласів

Ступінь підвищення антитіл може бути виражена в різному ступені. Для правильної інтерпретації результату на антитіла важливо оцінювати зміну їх рівня в динаміці.

Якщо не відбулося активації В-лімфоцитів через відсутність контакту з певним йому чужорідним антигеном, то наступною його трансформацію в плазматичну клітину, яка є фабрикою по виробництву імуноглобулінів, не відбувається, і такі клітини чекають своєї години. Якщо ж В-лімфоцит проконтактував з чужорідним агентом, то більшу роль відіграє місце зустрічі і тип чужорідного агента, який викликав імунну реакцію.

Можливо три варіанти розвитку подій:

• В-лімфоцити в фолікулах селезінки після зустрічі з білковим антигеном і Т-хелперів активуються з подальшим активним розподілом і диференціюванням на тривало живучі плазматичні клітини, які синтезують Ig G, IgA і IgE;
• Крайові В-лімфоцити в селезінці після контакту з антигенами, які є загальними чужорідними структурами для більшості сторонніх агентів, активуються з подальшим активним розподілом і диференціюванням на короткоживучі плазматичні клітини, які синтезують IgM;
• В-лімфоцити слизових оболонок або черевної порожнини після контакту з чужорідними агентами також активуються з подальшим активним розподілом і диференціюванням на короткоживучі плазматичні клітини, які синтезують IgM.

Таким чином, після проведення аналізу крові на антитіла і визначення спектра і рівня антитіл, можна судити про процеси, що відбуваються в організмі.

Підвищені антитіла можуть бути також при захворюваннях, що супроводжуються порушеннями в системі імунітету. До них відносяться парапротеінемії, які проявляються наявністю антитіл з функціональними і структурними дефектами при мієломній ряді інших хвороб.

Для чого слід проводити визначення антитіл

Аналіз крові на антитіла може істотно допомогти в діагностиці захворювань, що має велике значення для з’ясування природи захворювання і вибору найбільш вірної тактики лікування. Також визначення антитіл дозволяє оцінювати стан штучного активного імунітету, отриманого шляхом вакцинації і, таким чином, контролювати рівень захворюваності і потребу в вакцинації.

Однак, на жаль, антитіла, що покликані захищати організм людини, можуть в результаті різних порушень атакувати нормальні тканини організму.

Основні причини цього явища:

• Високий ступінь антигенної схожості чужорідних агентів з власними тканинами організму може призводити до того, що новоутворені антитіла атакують не тільки сторонні структури, а й свої власні;
• Деякі тканини організму, такі як кришталик ока і сперматозоїди в здоровому організмі безпосередньо не омиваються кров’ю, що захищає їх від помилкового розпізнавання організмом як чужорідних;
• В процесі дозрівання лейкоцити проходять кілька етапів відбору в лімфоїдних органах, що дозволяє вибраковувати дефектні клітини. Збій цього складного процесу призводить до утворення дефектних антитіл.

Позитивні антитіла

Позитивні антитіла, як правило, говорять про те, що пацієнт раніше зустрічався з чужорідним агентом, але це не завжди є результатом повноцінного інфекційного процесу. Це стало можливим завдяки широкому введенню вакцинації. Так, в якості вакцини можливе застосування живих, але ослаблених організмів, або мертвих частинок, представлених продуктами їх життєдіяльності. Для боротьби з інфекціями, тяжкість яких залежить від вироблення токсину, знайшли застосування вакцинації анатоксинами – токсинами, що втратили свої небезпечні властивості в результаті хімічної або фізичної обробки.

Проте, позитивні антитіла з високою впевненістю дозволяють підтвердити або, навпаки, виключити передбачуваного збудника захворювання.

Якщо результат на антитіла позитивний, це також можна використовувати для контролю напруженості імунітету з визначенням показань до вакцинації або ревакцинації, проведення яких дозволяє пом’якшувати тяжкість захворювань і запобігати епідемічним спалахам.

Також позитивні антитіла можуть визначатися після переливання імунної плазми крові або прямого введення в кровотік вже готових взятих у людини чи тварин імуноглобулінів, що інакше називається штучною пасивною профілактикою. Її метою є запобігання розвитку інфекційного процесу і полягає в швидкому утворенні імунних комплексів з подальшим розвитком реакцій, обумовлених біологічним ефектом антитіл.

Негативний результат на антитіла

Негативний результат на антитіла може спостерігатися в таких ситуаціях:

• помилка у визначенні передбачуваного збудника, що говорить про відсутність його ролі у виникненні хвороби;
• занадто раннє проведення діагностичного тесту;
• низька чутливість тесту або його брак, що виправдовує можливість повторного проведення в ряді випадків діагностичного тесту.

Проте, негативний результат на антитіла не є абсолютним доказом відсутності захворювання. Прикладом може служити вірус імунодефіциту людини, антитіла до якого визначаються зі значною затримкою. Тому проведення повноцінного фізичного і лабораторного обстеження, а також оцінка наявності антитіл є частиною єдиного комплексу заходів.

Антиспермальні антитіла

Антиспермальні антитіла взаємодіють з антигенами на поверхні сперматозоїдів. Вперше вони були визначені в крові чоловіків, які страждають на безпліддя, і описані Rumke і Wilson в 1954 р Ці антитіла визначаються у кожного п’ятого чоловіка з безпліддям і представлені, як правило, IgG, рідше IgA і IgM. Антиспермальні антитіла в нормі також можна виявити у чоловіків без порушень репродуктивної функції в 1-10% і у 5% безплідних жінок.

Аутоімунні антитіла не виникають в нормі завдяки гематотестикулярному бар’єру, ізолюючому клітини, які беруть участь в сперматогенезі. В основі цього бар’єру знаходяться клітини Сертолі і їх відростки. У сім’явивідних шляхах захист від утворення антитіл здійснюється здатністю сперматозоїдів звільнятися від антигенів та антитіл на зовнішній оболонці, а також спеціальними іммуносупрессірующімі факторами, що знаходяться в спермі.

При збої захисних механізмів, травмах мошонки і запальних захворюваннях репродуктивної системи підвищується ймовірність утворення антиспермальних антитіл.

Утворення антиспермальних антитіл можливо і у жінок. У нормі цього зазвичай не спостерігається, однак прийнято вважати, що супутні захворювання репродуктивної системи підвищують ризик розвитку цього явища.

На сучасному етапі не існує однозначної думки про вплив антиспермальних антитіл на репродуктивні властивості сперматозоїдів, хоча і вважається, що вони кілька знижують їх рухливість і виживання.

Антитіла до тиреопероксидази

У нормі антитіла до тиреопероксидази (ТПО) не спостерігається і, по факту, є проявом аутоімунних процесів, спрямованих проти щитовидної залози. У людини цей фермент відповідає за утворення радикалів йоду, необхідних для формування Т3 і Т4, тому антитіла до ТПО часто знижують синтез цих гормонів.

Антитіла до тиреопероксидази характерні для:

• тиреоїдиту Хашимото;
• дифузного токсичного зобу;
• післяпологового тиреоїдиту;
• аутоімунного тиреоїдиту;
• гіпертиреозу або гіпотиреозу у новонароджених.

Показанням до визначення антитіл до ТПО є також підозра на пошкодження щитовидної залози аутоімунної природи, що може проявлятися:

• збільшенням щитовидної залози без зміни її функції;
• зміною функції щитовидної залози.

Антитіла до ТПО можуть призводити до порушення регулювання синтезу гормонів, що клінічно буде проявлятися картиною гіпотиреозу або гіпертиреозу.

Зменшення антитіл до тиреопероксидази дозволяє судити про успішність лікування.

Аналіз на антитіла до ТПО при отриманні результатів, що викликають сумнів, рекомендується проводити в поєднанні з іншими аналізами для підвищення точності проведеного дослідження. До них відносять визначення:

• антитіл до рецептора ТТГ (анти-pTTГ);
• антитіл до тиреоглобуліну (антіТГ);
• кальцитоніну в сироватці крові;
• тиреоглобуліну;
• тиреотропного гормону (ТТГ);
• тироксину вільного (Т4 вільний);
• тироксину загального (Т4);
• трийодтироніну загального (Т3);
• трийодтироніну вільного (Т3 вільний).

Антитіла до ТПО і вагітність

Визначення антитіл до ТПО у матері під час вагітності дозволяє припустити розвиток гіпертиреозу у дитини як протягом внутрішньоутробного розвитку, так і після народження.

Показанням до визначення антитіл до ТПО можуть бути такі патологічні явища, як викидень, прееклампсія, передчасні пологи і невдалі спроби штучного запліднення.

Також рекомендується визначення антитіл до тиреопероксидази у новонародженого при їх наявності у матері під час вагітності або післяпологового тиреоїдиту. Виявлення відхилень дозволяє запобігти їх прогресуванню шляхом своєчасного початку лікування.

Антитіла до гепатиту с, в, д, а, е

Визначення антитіл до гепатитів С, В, D, А, Е відіграє велике значення у виявленні і диференціальній діагностиці цих, здебільшого, образливих захворювань. Так, з усіх цих захворювань тільки гепатит А протікає в більшості випадків без шкоди, в той час як інші вірусні гепатити можуть призводити до тяжких, незворотних наслідків.

Як правило, основним проявом цих захворювань є підвищення печінкових ферментів і виражена інтоксикація. Однак зрозуміти, який саме з вірусів вразив печінку, може дозволити тільки аналіз на антитіла до гепатитів С, В, D, А чи Е.

Антитіла до вірусу гепатиту А класу Ig M визначаються одночасно з маніфестацією хвороби, після чого їх титр наростає протягом місяця, знижуючись до нормальних значень протягом 10-12 місяців.

При гепатиті В діагностичне значення має визначення антитіл до HBs-антигену. Їх наявність може бути обумовлено як перенесеним інфекційним захворюванням, так і ефективної вакцинацією.

Анти-HBs-антитіла з’являються на 4-12-му тижні після інфікування і утворюють комплекси з HBsAg, в зв’язку чим вони можуть не визначатися, що називається «серологічним пропуском», тривалістю від тижня до місяця. Титри антитіл досягають максимуму до 6-12 місяців, і зберігають високий рівень 5 років і більше. Іноді антитіла можуть визначатися протягом усього життя. Також має діагностичне значення аналіз на антитіла HBsAg, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBeAg і anti-HBe.

Гепатит В у 90% випадків закінчується одужанням, проте в 10% випадків його перебіг набуває хронічного, прогресуючого характеру ураженням печінки, що закінчується найчастіше цирозом.

У ряді випадків до вірусу гепатиту В приєднується вірус гепатиту D, який не здатний існувати самостійно. В цьому випадку визначається anti-HD IgM.

Антитіла до гепатиту С у більшості інфікованих визначаються через 1-3 місяці після зараження, але також можливо їх відсутність більше року. Антитіла можуть не визначатися в 5% випадків.

Антитіла до гепатиту С класів IgM та IgG виникають на початку хвороби і утворюються до нуклеокапсиду. При тривалому, латентному перебігу або повторній активації захворювання відзначається поява IgG в крові.

Антитіла G класу протягом 8-10 років після маніфестації хвороби визначаються у високих титрах, після чого їх концентрація поступово знижується. Проте, аналіз на антитіла до гепатиту С залишається позитивним до кінця життя.

На відміну від гепатиту В, гепатит С більше схильний до хронічного перебігу, що спостерігається в 90% випадків захворювання. Результати ті ж, що і при гепатиті В.

Проведення аналізу на антитіла до вірусу гепатиту Е особливо важливо для діагностики захворювання у другому періоді вагітності, так як воно в 40% випадків закінчується смертю матері, і майже завжди – плоду.

Антитіла до вірусу імунодефіциту

Вірус імунодефіциту людини є однією з найболючіших проблем сучасного суспільства. В даний час, поширення ВІЛ носить характер пандемії, число випадків смерті від СНІДу перевищила 20 млн. Чоловік, а число інфікованих ВІЛ – 50 млн.

Основними шляхами передачі вірусу є статевий (під час незахищеного статевого акту) і парентеральний (характерний для внутрішньовенних ін’єкцій інфікованими шприцами або голками). Однак, на сьогоднішній день величезною проблемою стало поширення вірусу при таких звичайних діях, як лікування зубів у стоматолога, процедурах манікюру, педикюру і пірсингу. Також в особливій зоні ризику знаходяться лікарі, особливо – хірурги, анестезіологи та акушери-гінекологи.

Особливістю ВІЛ-інфекції є відсутність специфічних клінічних симптомів, в результаті чого маніфестація носить характер застуди або мононуклеозоподібного синдрому. Тому вирішальне значення в постановці діагнозу має визначення антитіл до вірусу імунодефіциту.

Для діагностики ВІЛ застосовуються скринінговий і підтверджуючий тести. Потреба в такому поділі методів діагностики обумовлено більшою вартістю і потребою в наявності спеціалізованого обладнання для проведення підтверджуючого тесту, що ускладнило б масове проведення аналізу на антитіла до вірусу імунодефіциту.

Алгоритм діагностики ВІЛ:

1. Проведення скринінгового тесту;
2. При позитивному результаті першого, проводиться другий скринінговий тест;
3. При позитивному другому скринінговому аналізі показано проведення підтверджуючого тесту;
4. Позитивний підтверджує тест дозволяє поставити діагноз ВІЛ інфекції.

Як правило, в якості скринінгу використовується метод ІФА.

Як підтверджуючий тесту в усьому світі визнаний метод імунного блотингу.

Проведення ПЛР, навіть при виявленні антигенів збудника, не є підставою для постановки діагнозу вірусу імунодефіциту людини.

Згідно з вимогами ВООЗ, аналіз на імунний блот прийнято вважати позитивним при виявленні антитіл до всіх, або до двох з трьох глікопротеїнів ВІЛ (gp160, gp 120, gp 41). Таким чином, при наявності антитіл тільки до одного глікопротеїну, результат вважають сумнівним і показано проведення повторного дослідження з використанням тест-системи іншого виробника або серії. При отриманні чергового сумнівного результату рекомендовано проведення спостереження протягом наступних 6 місяців, з повторним проведенням аналізу через 90 днів.

Через який час можна враховувати аналіз крові на антитіла в оцінці картини хвороби

Однак визначення антитіл раніше певного моменту не має сенсу в зв’язку з особливостями функціонування імунної системи. Ефективність аналізу крові на антитіла в більшій мірі залежить від того, в який раз людина зустрічається з чужорідним агентом. Так, якщо людина зустрічається зі збудником хвороби повторно, гуморальна відповідь не тільки розвивається швидше, але володіє більшою ефективністю, що обумовлено більшим ступенем відповідності епітопів антигенів.

Для першої зустрічі з чужорідним агентом спостерігається переважне підвищення антитіл класу М, що досягає піку і, відповідно, найбільшої ефективності через 5-10 днів. Антитіла G класу з’являються ще пізніше.

Для повторної зустрічі з чужорідним агентом характерно більш швидке формування імунної відповіді протягом 1-3 днів, яке характеризується більш ефективним приростом кількості антитіл. Антитіла G класу відіграють основну роль у розвитку імунного захисту. Крім того, при певній стимуляції, виникає диференціювання плазматичних клітин з виробництвом антитіл класу А або Е.

Таким чином, брати аналіз крові на антитіла раніше, ніж через 5 днів після інфікування у великій кількості випадків не має сенсу, що обумовлено занадто коротким терміном для активації імунної відповіді, хоча при повторній зустрічі зі збудником, аналіз визначить позитивні антитіла вже на 1-2 добу після інфікування. Однак, у зв’язку з тим, що у більшості захворювань інкубаційний період триває більше доби, точно визначити ідеальний момент для визначення антитіл практично неможливо, через що рекомендується оцінка їх рівня на початку і кінці захворювання.

Види аналізів на наявність антитіл в крові

Методом, що дозволяє визначити кількісні характеристики антитіл кожного типу в організмі, є електрофорез. Його дія заснована на різниці в поведінці білків на надходження на електричне поле. Цей метод дозволяє визначити, підвищені антитіла чи ні, але це не дає можливості з’ясувати, проти якого чужорідного агента вони утворені і, таким чином, показує лише загальну картину.

Серологічні реакції дозволяють визначити відсутність або наявність антитіл, що володіють специфічністю відносно шуканого антигену в біологічних рідинах.

До них відносять реакції:

• аглютинації;
• преципітації;
• нейтралізації;
• За участю комплементу;
• З міченими антитілами або антигенами.

Аглютинацією називають зв’язування антигенів, пов’язаних з великими нерозчинними частинками, такими як бактерії або еритроцити, при взаємодії з антитілами.

Аглютинація буває наступних видів:

• пряма аглютинація (дозволяє виявити антитіла в сироватці хворого і проводиться шляхом змішування суспензії убитих мікробів з кров’ю, що призводить до появи пластівчасті осаду);
• непряма гемаглютинація (дозволяє виявити антитіла в досліджуваному матеріалі і проводиться шляхом змішування еритроцитів, на яких знаходяться фіксовані антигени, що призводить до появи фестончатого осаду);
• реакція гальмування гемаглютинації (в результаті зв’язування антитіл з рецепторами вірусів, що володіють гемаглютинуючою здатністю, склеювання еритроцитів тварин, не відбувається);
• реакція коаглютинації (антигени збудника визначаються додаванням спеціально оброблених діагностичною сироваткою стафілококів).

При реакції преципітації спостерігається випадання в осад комплексів антиген-антитіло, де антигени повинні бути розчинними (не пов’язаними з великими, нерозчинними частинками). Після утворення комплексів антиген-антитіло випадає осад, званий преципітатом. Позитивним вважається результат на антитіла, при якому можна побачити кільце преципітату.

Реакцією нейтралізації називається блокування шкідливої ​​дії мікробів або їх токсинів після взаємодії з імунною сироваткою, що обумовлено їх зв’язуванням з антитілами з утворенням комплексів антиген-антитіло.

Комплементом називають складну систему вродженої гуморальної відповіді, яка після активації отримує здатність до опсонізації, полегшення фагоцитозу і цитолизу чужорідних агентів. При проведенні реакції за участю комплементу використовується його здатність до взаємодії з імунними комплексами. Тому спочатку змішуються сироватки з відомими антигенами. Потім, якщо утворилися комплекси антиген-антитіло, білки комплементу вичерпуються. Якщо ж утворення комплексів не відбулося, то система комплементу залишається здатною до активації. Для того, щоб це з’ясувати, додаються еритроцити і антиеритроцитарні антитіла, які зв’язуються з утворенням імунних комплексів, після чого спостерігається гемоліз еритроцитів, обумовлений дією комплементу, або спостерігається пластівчастий осад, якщо активації не відбулося.

Реакція з міченими антитілами або антигенами, або реакція імунофлюоресценції заснована на обробці досліджуваного матеріалу сироваткою, що містить антигени або антитіла, помічені флюорохромами, що в разі утворення імунних комплексів дає можливість спостерігати світіння при освітленні ультрафіолетовою лампою при вивченні через мікроскоп.

При застосуванні не флюорохромів, а ферментів (пероксидази або лужної фосфатази), метод називають імуноферментним аналізом. Результат оцінюється по зміні забарвлення.

Радіоімунологічний метод дозволяє визначити наявність антитіл або антигенів, помічених радіонуклідами та їх кількість після взаємодії з досліджуваним матеріалом (антигенами або антитілами в сироватці пацієнта).

Моноклональні антитіла і їх застосування

Одна клітина В-лімфоцитів здатна виробляти антитіла, комплементарні виключно до одного антигену. Це було використано для отримання моноклональних антитіл, які по праву можна вважати одним з найбільш важливих технічних досягнень в області імунології, з колосальними перспективами для клінічної медицини і наукових досліджень. Для того, щоб отримати моноклональні антитіла, В-клітини від тваринний, імунізованих антигеном, які мають короткий термін життя, схрещують з клітинами мієломи (пухлини плазматичних клітин), які можуть бути розмножені нескінченну кількість разів при забезпеченні необхідних умов. Клітини, отримані шляхом такого злиття, називають Гібридоми. З популяції отриманих гібридом можна вибрати і клонувати безперервно зростаючі клітини, які секретують потрібні антитіла, які називають моноклональними.

Величезна кількість варіантів синтезованих антитіл дозволяє підібрати практично будь-які моноклональні антитіла проти практично будь-якого антигену. Однак на шляху широкого застосування цього методу були певні перешкоди. Так як речовини, що синтезуються в чужому організмі, чужорідні і викликають імунну відповідь, повторне введення тих же препаратів не викликало переслідуваного ефекту. Згодом ця проблема була вирішена збереженням варіабельних областей, що відповідають за їх відповідність антигенів, із заміною константних ділянок на людські.

Зовсім недавно моноклональні антитіла були синтезовані з використанням технології рекомбінантної ДНК, що кодує антитіла людини. Це дало можливість обирати антитіла, що мають бажані Fab-фрагменти.

Моноклональні антитіла широко застосовуються в якості терапевтичних і діагностичних засобів в боротьбі з багатьма захворюваннями людей.